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公司新闻/正文
淀粉样斑块相关的小胶质细胞超量分泌细胞外囊泡，并在人源化APP小鼠模型中加速tau病理
1085 人阅读发布时间：2021-07-20 18:07
【摘要】
小胶质细胞有助于阿尔茨海默氏病的tau病理学进展，淀粉样斑块的积累将小胶质细胞转变为神经变性小胶质细胞（MGnD），这些小胶质细胞具有增强的吞噬功能，可吞噬含有聚集和磷酸化的tau的斑块、凋亡神经元和营养不良性神经突，但目前尚不清楚小胶质细胞如何主动吞噬病理蛋白，进而改善病理状态的同时促进疾病进展。因此作者在C57BL / 6小鼠5个月时，将表达P301L tau突变体的腺相关病毒（AAV-P301L-tau）立体定位注射于WT和人源化APP突变敲入纯合子（AppNL-GF）小鼠的内嗅皮层（MEC）中，6个月后检测小胶质细胞。为体内监测小胶质细胞外囊泡（EVs）分泌，设计了新型的慢病毒EV报告基因系统mEmerald-CD9，专门在小胶质细胞中表达，注入MEC的同一区域。最终结果表明，MGnD小胶质细胞超分泌p-tau+的EVs，压实Aβ斑块并清除NP tau蛋白。
【前言】
小胶质细胞是中枢神经系统的免疫细胞，最近有研究发现一类疾病激活的小胶细胞（MGnD），这种细胞受TREM2和ApoE调节，破坏CNS的稳态。但是目前对于MGnD小胶细胞对神经退行性疾病的作用仍然存在争议，且尚不确定在存在Aβ淀粉样斑块沉积的情况下，小胶质细胞是否加速对tau的传播。因此作者选择性清除小胶细胞后验证小胶细胞在tau病理发展过程中的作用。
【结果】
PLX5622给药2个月后能消耗93%以上的小胶质细胞（标志蛋白IBA1），同时小胶质的消耗会引起Aβ 斑块紧密性降低，但增加了其大小、数量和面积。但并不影响AppNL-G-F 小鼠脑中Aβ 斑块周围星形胶质细胞的增加。表明AppNL-G-F 小鼠脑中小胶质细胞影响着Aβ 斑块的形成及紧密性。
但在AppNL-G-F小鼠脑中清除小胶细胞后，小胶质细胞来源的C1q表达水平显著降低，表明小胶质细胞衍生的蛋白质不参与上述过程。通过IF分析荧光标记MGnD的Clec7A和EVs的TSG101，发现它们共定位于MGnD中，且随PLX5622的处理均减少。另外Clec7A+的MGnD显著表达EV的标志蛋白如CD9和CD63，意味着MGnD能大量分泌EVs。表明MGnD小胶细胞吞噬NP tau，过度分泌EVs，增加tau的传播。
进一步验证MGnD小胶细胞比正常小胶细胞释放更多的EVs，作者开发了表达mE-CD9融合蛋白的特异性慢病毒。体内定量分析了MGnD小胶细胞和稳态小胶细胞释放VEs的数量，结果表明：Aβ斑块诱发的MGnD小胶细胞释放更多的EVs。
MGnD小胶细胞释放更多的EVs，那么EVs可能包裹p-tau蛋白。作者在联合使用mE-CD9和 AAV-P301L-tau，借助IF实验证明MGnD小胶细胞来源的EVs包裹更多的p-tau蛋白。从分离出EVs进行进一步验证，MGnD小胶细胞来源的EVs数量是稳态小胶细胞的三倍，而且包裹更多的p-tau蛋白。表明小胶质细胞分泌的EV携带tau种子，且这种现象因小胶质细胞转变为MGnD而增强。
