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公司新闻/正文
文献解读：超声法进行外泌体载药
7615 人阅读发布时间：2022-03-24 18:05
众所周知，EVs 可以装载的药物包括化疗药物和核酸，例如信使 RNA（ mRNA）， miRNA，小干扰 RNA（ siRNA）和小核仁 RNA（ snoRNA）。 EVs 的来源，分离方法，标记方法以及给药途径都会影响药物递送。分离出 EVs 后，可以通过物理或者化学法装载药物的方法有： 超声法、混和共培养、电穿孔、冻融循环、挤压、皂素透化、转染试剂（包括脂质体）、Cacl2。
外泌体载药问题解答：
1. 研载生物能提供哪些方法的载药服务呢？
答：超声法、混合共培养法、冻融循环、挤压、皂素透化、转染试剂（包括脂质体）、CaCl2这些方法均可实现，常用方法有以下三种：
①基于超声的药物加载方法，使用超声探头施加超声能量，从而降低 EV 膜的刚性，实现药物扩散；②混合共培养法载药；③脂质转染试剂（ Lipofectamine），通过利用阳离子物质促进与脂质膜的相互作用和随后的内在化，可有效将核酸加载到 EVs 内部。
2. 研载生物可以利用这些方法使外泌体负载哪些类型的药物呢？
答：①小分子药物紫杉醇、阿霉素、紫草素等；②核酸有miRNA、siRNA等；③质粒；④多肽；⑤壳寡糖等大分子；⑥Lamp2b（溶酶体相关膜蛋白2），Mapk1（促分裂原活化蛋白激酶1）。等等。
3. 研载生物能提供哪些外泌体载药后的检测服务呢？
答：①高效液相色谱（HPLC）：检测小分子药物装载效率；
②荧光分光光度计检测：通过荧光分光光度计 F-4600在 594 nm 和 480 nm 激发下检测 Dox 的内在荧光，对装载 Dox 的外泌体进行量化；
③共聚焦或流式检测荧光标记：对装载的外来物进行荧光标记，例如miRNA-CY3（CY3为红色荧光标记），外泌体进行绿色标记，通过荧光观察绿色标记外泌体中红色荧光比例或流式检测，均可以说明装载效果。
④qPCR检测：对于miRNA，通过qPCR检测miRNA表达水平；对于siRNA，通过qPCR检测敲低效率。
⑤western blot检测：对于miRNA，通过western blot检测靶蛋白的表达水平；对于siRNA，通过western blot检测敲低效率；
⑥透射电镜、外泌体粒径检测：鉴定药物是否装载，但效率不能用该方法评估。
此外，您如果有文献参考的其他装载及检测方法，研载生物可对其进行评估确定是否具有可操作性。
以上解读由研载生物专业技术提供。
研载生物专注于外泌体研究，致力于提供外泌体一站式服务，服务内容包括：外泌体提取鉴定、染色示踪、测序、细胞实验、动物实验等整体服务。
咨询热线：021-54376058
手机（微信同号）：13917998048 18516646410
1. 研载生物能提供哪些方法的载药服务呢？
答：超声法、混合共培养法、冻融循环、挤压、皂素透化、转染试剂（包括脂质体）、CaCl2这些方法均可实现，常用方法有以下三种：
①基于超声的药物加载方法，使用超声探头施加超声能量，从而降低 EV 膜的刚性，实现药物扩散；②混合共培养法载药；③脂质转染试剂（ Lipofectamine），通过利用阳离子物质促进与脂质膜的相互作用和随后的内在化，可有效将核酸加载到 EVs 内部。
2. 研载生物可以利用这些方法使外泌体负载哪些类型的药物呢？
答：①小分子药物紫杉醇、阿霉素、紫草素等；②核酸有miRNA、siRNA等；③质粒；④多肽；⑤壳寡糖等大分子；⑥Lamp2b（溶酶体相关膜蛋白2），Mapk1（促分裂原活化蛋白激酶1）。等等。
3. 研载生物能提供哪些外泌体载药后的检测服务呢？
答：①高效液相色谱（HPLC）：检测小分子药物装载效率；
②荧光分光光度计检测：通过荧光分光光度计 F-4600在 594 nm 和 480 nm 激发下检测 Dox 的内在荧光，对装载 Dox 的外泌体进行量化；
③共聚焦或流式检测荧光标记：对装载的外来物进行荧光标记，例如miRNA-CY3（CY3为红色荧光标记），外泌体进行绿色标记，通过荧光观察绿色标记外泌体中红色荧光比例或流式检测，均可以说明装载效果。
④qPCR检测：对于miRNA，通过qPCR检测miRNA表达水平；对于siRNA，通过qPCR检测敲低效率。
⑤western blot检测：对于miRNA，通过western blot检测靶蛋白的表达水平；对于siRNA，通过western blot检测敲低效率；
⑥透射电镜、外泌体粒径检测：鉴定药物是否装载，但效率不能用该方法评估。
此外，您如果有文献参考的其他装载及检测方法，研载生物可对其进行评估确定是否具有可操作性。
以上解读由研载生物专业技术提供。
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