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研载生物科技（上海）有限公司
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公司新闻/正文
【Aging Cell】11分＋研究证明：运动能促进外泌体释放，让你更年轻健康！
797 人阅读发布时间：2022-07-18 15:25
烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD+）是细胞内能量代谢的必须物，其含量在衰老过程中呈下降趋势，影响着寿命及年龄相关的健康状况。烟酰胺磷酸核糖基转移酶NAMPT是NAD+生物合成途径中的限速酶，存在于细胞内和细胞外（即iNAMPT和eNAMPT），eNAMPT存在于EV中，被细胞摄取后能提高NAD+水平。目前尚不清楚eNAMPT释放的生理原因，及其如何受年龄和运动的影响。澳大利亚斯威本科技大学和Exopharm公司联合研究了年龄及运动对人体eNAMPT释放的影响，确定了年龄和运动对参与NAD+生物合成的细胞外信号通路的影响。并将研究成果发表在Aging Cell(IF:11.0047)上。
文献连接：https://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1111/acel.13647
技术路线：
1. 运动及年龄对人体eNAMPT的影响
按年龄和有氧适能将受试者分成4组，分别收集运动前后的血浆，从中分离EV，通过纳米颗粒分析仪对不同组的EV进行分析，发现各组的EV粒径大小不随运动变化，但运动会促进EV释放。
通过WB分析NAMPT敲除和对照C2C12细胞内NAMPT蛋白质水平，验证了NAMPT抗体的有效性和特异性。接着，对各组运动前后EV中TSG101和NAMPT的表达进行WB分析，运动后各组TSG101水平均有所增加，但各组间无差异；年轻组和成熟健康组人员在运动后EV中的eNAMPT相对表达量均有所增加，年轻健康组是显著增加的组。
2. 来自运动人体的含有eNAMPT的EV可促进受体细胞中NAD+和SIRT1的活性
首先用Exopharm公司的荧光染料Exoria标记MF组运动前后的EV，与C2C12细胞共孵育60min，共聚焦显微镜下即可观察到EV被C2C12细胞摄取，Z堆叠成像显示EV通过跨细胞膜内化的。接着用比色测定法测定了运动前后EV对C2C12细胞内NAD+丰度的影响，结果显示两个年轻组运动后EV处理细胞1hr能显著增加细胞NAD+的丰度。用放线jun酮CHX抑制细胞内蛋白质翻译后，YF组运动后的EV依然能上调NAD+的丰度，说明EV对NAD+的作用并非是通过上调蛋白质表达引起的，结合作者的实验及控制时间，可以确认eNAMPT在此过程中起主要作用。同时检测了运动前后EV对细胞内NAD+依赖性酶SIRT1的活性，结果证实eNAMPT的下游通路在YX和YF组EV处理后，在受体细胞内被激活。
讨论:
本研究发现运动会促进EV的释放，促进健康年轻人EV中eNAMPT的含量，成熟健康组在运动后表现出与不健康年轻组相似的EV-eNAMPT释放量，说明运动可以克服与年龄相关的eNAMPT释放下降。释放的EV-eNAMPT促进受体细胞中NAD+和SIRT1的活性，说明运动可通过EV诱导跨组织信号传导以维持多个器官中的代谢稳态，在衰老期间改善健康。但是否不健康年轻人的NAMPT可用性低、EV包装机制是否在年长和不健康个体中减弱、以及eNAMPT在运动过程中如何进入EV的，均需进一步探究。